老年性痴呆（AD）为一种中枢神经系统原发性退行变性疾病，以记忆、认知、人格、智力障碍及情感改变为主， 影响患者的感觉、运动、语言、生活能力[ 1]。大脑皮层及海马区的淀粉样蛋白在胞外积累并形成老年斑、脑神经细胞内T au 蛋白异常聚集形成的神经原纤维缠结[ 2]、锥体神经细胞凋亡及神经元突触功能异常。老年痴呆发病率高、难攻克，据阿尔茨海默氏病国际的年度报告[3]，约4.7%老年人患有不同程度的AD，因此探讨黄连解毒汤对老年痴呆病的部分作用机制和疗效。

　　1 材料和方法

　　1. 1 药品和试剂 黄连解毒汤由齐齐哈尔中医院提供； 安理申， 卫材药业有限公司， 进口药品注册证号H20050978; 一抗：NGF （H-20） IgG200uml, C- Fos（ K-25） , IgG200u 均购自SANTACRUZ公司， 二抗（ 生物素标记的羊抗兔血清）及相应试剂盒由北京中山生物技术有限公司提供， 美国Zymed公司产品。固定灌注液6000 ml: 4%多聚甲醛固定液；前固定液100 ml:4%多聚甲醛固定液，哈尔滨医科大学提供。

　　1. 2 实验动物  90只SA M - P/ 8小鼠， 9个月龄（ 体重25~30g） 雄性， 天津实验动物中心提供。30只健康昆明种小鼠9月龄雄性， 哈尔滨医科大学黄小义博士提供。

　　1. 3 动物分组及给药  SA M - P/ 8小白鼠按随机分配原则分为三组，每组30 只分别是模型组、实验组、治疗组。健康昆明种小鼠30只为空白对照组。实验组用黄连解毒汤2ml/只。天灌胃； 治疗组用安理申混悬液灌胃200mg/kg。每日给药2次，灌胃4 周，每隔4天休息1天。

　　1. 4 Morris水迷宫实验  各组动物在给药4周后， 依文献方法进行Morris 水迷宫训练一周[ 4], 期间继续给药， 训练7 d 完成后测验小鼠跨越平台次数、寻找平台的潜伏期以及在原平台象限游泳距离与总游泳距离的比例。

　　1. 5 检测神经营养因子表达 采用SP法处理各组小鼠，治疗组用PSS代替一抗外，其他步骤相同。

　　1.6统计学方法 采用SA S统计软件处理，实验结果使用配对t检验。

　　2 实验结果

　　2. 1 Morris水迷宫实验 模型组与空白组比较， 寻找平台潜伏期长，差异显著（P < 0.05），表明模型鼠空间探索能力进一步下降。而实验组和治疗组均能缩短潜伏期、增加过台次数， 与模型组相比具有差异（P < 0.05） , 说明防治有效。各给药组与模型组比较， 在原平台所在象限游泳距离与总游泳距离的比值更大， 差异有显著 （ P < 0.05） , 表明各给药组对原平台象限的记忆较模型组好， 即对 SAM - P/8 小鼠显著的改善记忆作用，

　　2. 2 免疫组化指标 实验组 SAM - P/ 8 小鼠海马 CA1区NGF蛋白积分光密度总和降低， 模型组比较空白对照组、治疗组明显降低， 呈极显著性 （ P < 0. 05） ; 实验组大鼠积分光密度总和较空白对照组和治疗组降低， 呈显著性差异 （ P< 0. 05） ; 与模型组比较 NGF 蛋白积分光密度总和升高显著， 呈极显著性（ P < 0. 05） 。提示复方地黄能使 SA M - P/ 8 小鼠海马下降的N GF 蛋白积分光密度总和的升高

　　3 讨论

　　近年来根据现代中医“ 毒损脑络”学说，清热解毒中药用于防治AD成为一条新的重要途径[5]研究中黄连解毒汤缩短实验组小鼠的潜伏期，改善其学习记忆能力，实验组和治疗组均能缩短潜伏期、增加过台次数， 与模型组相比具有明显差异 （ P < 0. 05） , 说明防治有效。模型组 NGF 蛋白免疫阳性细胞的光密度值最低， 实验组光密度值较模型组有所升高，治疗组和空白对照组的光密度值最高，各组差异提示黄连解毒汤能促进 SA M - P/ 8小鼠海马 NGF 的合成。因此推测： 黄连解毒汤改善模型痴呆小鼠学习记忆能力的机制，促进中枢胆碱能神经元的营养和修复。综上所述， 黄连解毒汤可以改善 SAM - P/8 小鼠的学习和记忆能力， 增加起脑内神经生长因子的含量，说明黄连解毒汤对实验性早老性痴呆小鼠具有较好的防治作用。

　　参 考 文 献

　　[ 1] 沈渔 邨 . 精神病 学 [ M ] . 第 3 版 . 北京 : 人民卫生 出版社，199 9: 3 81

　　[ 2] H u Y , Ling ZH Q , Shan XY . Molecular Medicine in Cell Apoptosis [ M ] . Beijing: Mil itary Medical Sicence Publishing House, 200 2: 62- 69; 386 - 3 89

　　[3] Alzheimer’s disease international, World Alzheimer Report,2009, Executive Summary.

　　[4] Morris R. Development s of W ater - M aze proce2 dure for studying spetial learning in the rat [ J ] . N eurosci M et hods,1 984 , 11 : 47 1

　　[5] 孙明杰，于友华。清热解毒中药防治老年性痴呆之理论探讨[J].中国

　　中医基础医学杂志，2003，9（2）：17-24.