乳腺癌是现今威胁女性身体健康的恶性肿瘤之一，由于其发生、发展的分子机制仍不清楚， 一定程度上影响了乳腺癌的治疗进展[1]。而姜黄素（curcumin）具有降血脂、抗肿瘤、抗氧化等作用[2].但姜黄素口服给药途径的生物利用度低，使其在多种非胃肠道肿瘤中的效果不显著，脂质体制剂能提高姜黄素的水溶性和生物利用度。

　　实验材料及方法

　　1.1、实验材料

　　乳腺癌细胞细胞株购自中国协和基础学院细胞中心，6周龄雄性C57BL/6小鼠30只，体质量20g购自四川大学实验动物中心，TGF-β1、Smad3、Smad7购于北京博奥森生物技术有限公司。

　　1.2试验方法

　　1.2.1脂质体的构建 此过程已由前期实验完成。

　　1.2.2分组并给药 将小鼠随机分成实验组、模型组和对照组。实验组小鼠由姜黄素脂质体介导光化学转染VEGF SiRNA，模型组腹腔注射注射液，对照组不做任何处理，连续实验15天，常规饲养。

　　1.2.3采集实验标本 实验进行15天后，将禁食12h的小鼠称重，脱颈处死，消毒剥离肿块，称重并比较。称重后将肿瘤组织制成病理切片进行免疫组化染色并在光学显微镜下观察其变化。

　　1.2.4染色强度检测 检测TGF-β1,Smad在肿瘤细胞中的染色强度及定位表达，阳性单位（PU）代表染色的强度，检测方法为S-P检测法。计算公式：PU=100× [Ga - GA]（/[ 1 - AAa）·Gmax]，AAa = n/（n + m）。

　　1.3转染后VEGF蛋白表达的SP免疫细胞化学染色检验 制备细胞切片，经固定后按说明书进行操作。用VIDAS图像分析软件对每张玻片视野下的细胞进行分析。

　　1.4统计学分析

　　采用SPSS11.0统计软件建立数据库，对上述检验的结果进行t检验和方差分析。

　　实验结果

　　2.1转染后各组肿瘤细胞中VEGFmRNA的表达  利用琼脂糖凝胶电泳实验来检测各组中SiRNA的条带，扫描发现实验组的表达量有明显减少，减量平均为48%。

　　2.2肿瘤的生长情况 所有小鼠均出现结节，实验组的瘤体的平均质量为（1.58±0.27），模型组的瘤体的平均质量为（ 2.56±0.88），对照组的瘤体的平均质量为（ 2.90±0.52 ）。经分析，差异有统计学意义，P<0.05。

　　2.3TGF-β1信号通路的传导 依据参考文献[3-5]，TGF-β1的SP检测阳性多分布于胞浆间质着色较浅。检测发现TGF-β1通路被阻断，模型组和对照组没有此现象。

　　2.4 Smad3、Smad7蛋白的表达 Smad3、Smad7免疫组化以胞浆内出现棕黄色颗粒或团块为阳性反应。检测结果为实验组Smad3染色强度低于模型组和对照组，实验组Smad7染色强度高于模型组和对照组。

　　2.5 TGF-β1、Smad之间的相关性分析 对各组小鼠的TGF-β1、Smad的数据进行线性分析，结果显示两两之间的表达具有相关性。

　　讨论

　　近年来，随着细胞生物学和分子生物学的飞速发展，乳腺癌的治疗也取得了一定发展。依据实验结果初步认为TGF-β1、Smad之间具有相关关系，结果显示肿瘤的生长受到了抑制，本实验研究的TGF-β1、Smad之间有密切的关系， Smads家族在TGF-β1信号通路转导过程中由不可或缺的作用，Smad7是TGF-β1信号传导通路中的重要抑制因子，而TGF-β具有调节细胞生长和各种类型细胞分化的作用，降低机体对肿瘤的监控能力，所以实验组的小鼠出现TGF-β1信号通路部分被阻断的情况。此研究的实验结果表明，姜黄素脂质体介导光化学转染VEGF SiRNA 后有一定的抑制肿瘤生长的作用，对裸鼠进行实验干预后，发现TGF-β1信号通路的传导受到抑制，Smad7的表达上调，Smad3的表达下调，但肿瘤生长受到抑制是否与其表达的改变有相关关系，且其影响的机制究竟是如何均有待进一步研究。

　　[1]  Hoefield RA, Kalra PA, Baker PG, et al. the use of eGFR and ACR to predict decline in renal function in people with diabetes. Nephrol Dial Transplant,2011；26（3）：887-892

　　[2] Maheshwari RK, Singh AK, Gaddipati J, et al. Multiple biological activities of curcumin: a short review. Life Sci,2006;78（18）：2081-2087

　　[3］毛礼蛟，王永征，王晓秋。乳腺肿瘤中CD44v6、TGF-β1、TGF-βRII的表达与临床和病理特征的关系［J］。现代肿瘤医学，2005，13（2）：193-196.

　　[4］范宜锋，王文奇，白文坤，等。他莫昔芬对人肝癌HepG2 细胞增殖和Smad7 表达的影响［J］。山东大学学报（医学版），2009，47（12）：58-60，65.

　　[5］林寿宁，王振常，何磊，等。壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβR I/Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7表达的影响［J］。世界华人消化杂志，2008，16（10）：1105-1109.